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不同批号的尼龙网膜其没湿速率不同，若膜在水面上漂浮几分钟仍未湿透，直接换一张新的膜，因为未完全浸湿的膜用于RNA转移是不可靠的，碱性转移缓冲适于将RNA转移至带正电荷的尼龙网膜，而中性缓冲液适于将RNA转移至不带电荷的尼龙网膜。